在細胞生物學研究中，難轉染細胞系往往是科研進程的 “攔路虎"。從常出現轉染效率不足 10% 的血液系統(tǒng)腫瘤細胞系，到對傳統(tǒng)試劑高度耐受的神經細胞系等，這些細胞憑借特殊的生理結構與代謝機制，讓許多科研人員在基因遞送環(huán)節(jié)屢屢碰壁。而今天要為大家介紹的 ProteanFect®正是專為攻克這類 “頑固" 細胞系而生的創(chuàng)新工具，更有關于在轉染過程中 “是否添加試劑 C" 的關鍵疑問解答，助力你的實驗效率翻倍！

一、難轉染細胞系的 “痛點"， ProteanFect®精準擊破！

難轉染細胞系的轉染難題，主要源于三大核心障礙：細胞膜屏障堅固，胞內降解機制活躍，細胞毒性敏感。傳統(tǒng)脂質體、病毒載體常導致細胞凋亡，尤其對腫瘤細胞系、原代衍生細胞系影響顯著。而 ProteanFect®通過全·球首·創(chuàng)的自組裝蛋白納米顆粒技術，從根源上解決了這些問題。它利用哺乳動物內源蛋白與核酸自組裝形成的凝聚體，模擬細胞內部天然的轉運與調控機制。進入細胞后，凝聚體能順利被內吞、精準釋放核酸，并最終通過細胞代謝自然清除載體蛋白。與傳統(tǒng)脂質體或病毒載體不同，ProteanFect®并不“強行闖入"，而是借助細胞“熟悉"的方式完成轉染，從而在高效率與低毒性之間實現了難得的平衡。

二、實測數據說話：ProteanFect®在難轉染細胞系中的 “硬實力"

為驗證ProteanFect®對難轉染細胞系的轉染效果，西湖凝聚體科研團隊針對此類典型難轉細胞系進行系列驗證結果令人驚艷。以 Jurkat T 細胞轉染為例，轉染 GFP-mRNA和GFP質粒后，48 小時內熒光陽性細胞比例可高達 50%-80% ；相比傳統(tǒng)脂質體試劑，轉染效率顯著提升。這一數據體現了ProteanFect®對難轉染細胞系的高效轉染。

三、關鍵疑問：針對難轉染細胞系，是否需要加試劑 C？

在使用 ProteanFect® 時，許多科研人員會糾結于配套的試劑C是否必要？ 答案并非 “一刀切"，可根據細胞系類型進行探索。試劑C能提升轉染效率，尤其對原代細胞和一些難轉細胞系效·果顯·著。我們已驗證部分細胞系是否需要添加試劑C，詳見附表。

對于未驗證的細胞，建議實驗測試。具體操作為：不加試劑C，轉染復合物需和細胞孵育45分鐘；加試劑C則需加入8微升，與細胞孵育30分鐘即可。最終轉染方案應綜合轉染后細胞活力和效率確定。

四、操作小貼士：讓 ProteanFect®在難轉染細胞系中發(fā)揮最佳效果

1. 核酸質量把控：轉染前需確保 DNA 無內毒素（建議使用無內毒素試劑盒提?。?，OD260/280 值在 1.7-1.9 之間；mRNA 需無 DNA 污染，且完整性良好。

2. 細胞狀態(tài)準備：轉染前 1 天更換新鮮培養(yǎng)基，確保細胞密度處于對數生長期，新復蘇的細胞需傳代 2-3 次后再進行轉染。

結語

面對難轉染細胞系的 “刁難"，ProteanFect®憑借創(chuàng)新的蛋白納米顆粒技術，打破了傳統(tǒng)轉染試劑的局限，為科研人員提供了高效、低毒的轉染解決方案。如果你正在為 Jurkat T、K562、SH-SY5Y 等難轉染細胞系的實驗發(fā)愁，不妨試試 ProteanFect®—— 讓 “難轉染" 不再成為科研路上的絆腳石！ 

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